摘要:通过对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的MIC值检测和MBC值检测,比较戊癸消,戊二醛癸甲溴铵溶液,复方戊二醛溶液,安立消,百毒杀,月苄三甲氯铵溶液等六种常用消毒剂的抑菌效果,综合评价以安立消和百毒杀效果最好,安立消对沙门氏菌的消灭作用最强。
关键词:病原菌、MIC值检测、MBC值检测
中图分类号:S 文献标识码:B 文章编号:2096-3637(2017)07-0034-02
1试验材料
1.1病原菌
山东省安丘市官庄镇某鸡场粪便培养的杂菌,主要包括大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌,大肠杆菌及沙门氏菌标准株(安丘市畜牧检测中心保存)。
1.2消毒剂
戊癸消,戊二醛癸甲溴铵溶液,复方戊二醛溶液,安立消,百毒杀,月苄三甲氯铵溶液等六种常用消毒剂。
1.3其它材料
无菌平皿、营养肉汤、营养琼脂、TSB(胰蛋白胨大豆肉汤培养基)、胎牛血清、微量移液器。
2试验方法
2.1消毒劑对细菌的MIC值检测
(1) 将杂菌接种到盛有10ml肉汤的试管中,置于37℃温箱过夜培养,将培养好的菌液稀释100倍。(2)将制备好的菌液进行活菌计数并测定菌液OD600值,然后用液体培养基稀释,使试验菌液的含菌量为5×105~5×106cfu/ml;(3)取96孔微量反应板,每孔加入100μL灭菌纯化水;(4)于第一孔加稀释l00倍的消毒剂,混匀后,倍比稀释直至第10孔,混匀后取出100μL弃去,第11孔不加消毒剂作为阴性对照,第12孔作为阳性对照;(5)将稀释到106cfu/mL的100μL菌液加入到1~11孔,混匀;(6)置37℃培养箱培养24 h,若发生混浊即表示有细菌生长。
2.2消毒剂对细菌的MBC值检测
(1)将制备的菌悬液进行活菌计数,然后用无菌水稀释成106 ~107cfu/mL;
(2)于第一孔加稀释250倍的消毒剂100μL,混匀后,倍比稀释至第五孔,消毒剂稀释倍数分别为500倍、1000倍、2000倍、4000倍、8000倍,设置阳性对照;(3)将稀释好的菌液加入到消毒剂中,室温作用30min后进行涂板检验;
(4)置37℃培养箱培养24 h;(5)进行活菌计数,计算杀菌率。
3试验结果与分析
由表1可以看出,安立消、百毒杀对金黄色葡萄球菌抑菌作用最好(1:25600)
3.1金黄色葡萄球菌MIC值检测结果
3.2大肠杆菌分离株MIC值检测结果
由表2可以看出,戊二醛癸甲溴铵溶液,安立消,百毒杀,月苄三甲氯铵溶液4种产品对大肠杆菌抑菌作用都较好(1:51200)
3.3沙门氏菌MIC值检测
3.4杀菌效果分析
由表3可以看出,复方戊二醛,安立消,百毒杀三种产品对沙门氏菌的抑菌作用最强(1:51200)
从表4中得出在1:2000倍稀释时这4种消毒剂都能将金黄色葡萄球菌分离株100%杀死。
从表5中得出在1:2000倍稀释时这4种消毒剂都能将大肠杆菌分离株100%杀死。
从表6中得出在1:2000倍稀释时这4种消毒剂都能将沙门氏菌100%杀死,产品1,产品4,产品6在1:4000开始有细菌生长,在1:8000时安立消作用最强。产品6杀灭作用最差。
4讨论
试验结果表明,6种消毒剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌均有不同程度的抑制和杀灭作用,其中安立消和百毒杀对3种细菌的抑制作用都很好;将消毒剂1:2000倍稀释和1:4000倍稀释时都能將3种细菌100%杀死,在对沙门氏菌的杀灭试验中,安立消作用最强。
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