hOGG1基因多态性与胃癌遗传易感性的关系

[摘要] 目的 探讨人类8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1（hOGG 1）基因多态性与胃癌遗传易感性的关系。 方法 收集河南郑州和开封地区98例胃癌患者和80例非肿瘤对照组志愿者外周血样，应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测法检测胃癌人群的外周血中DNA损伤修复酶基因多态性，分析其与肿瘤遗传易感性的关系。 结果 hOGG1Ser326Cys基因的各基因型频率在胃癌组和对照组间的分布差异有统计学意义（P<0.05）。携带Cys326Cys基因型者胃癌的发病风险增加1.7倍（OR=1.706，95%CI=0.341～2.462，P=0.002）。hOGG1Ser 326Cys基因多态性与酒的交互作用增加胃癌的发病风险（S>1，API=0.38）。 结论 Cys326Cys基因型是胃癌发病的危险基因型，携带Cys易感基因与饮酒交互作用时可能增加患胃癌的易感性。

[关键词] 基因多态性；胃癌；遗传易感性

[中图分类号] R735.2 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）20-27-03

人类8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1（human 8-oxoguanine DNA glycosylase 1，hOGG 1）基因是人的碱基切除修复基因，编码的DNA损伤修复酶hOGG1蛋白是一种DNA糖苷酶，能够识别并切除DNA的氧化损伤产物8-羟基脱氧鸟嘌呤（8-hydroxy-2-deoxyguanosine，oh8Gua）[1]。oh8Gua的形成频率高，致突变性强，被认为在肿瘤的发病过程中有重要作用[2]。hOGG1基因第7外显子的第1245位碱基具有C/G多态性，使第326位密码子导致Ser→Cys氨基酸替代，使其编码的酶活性发生变化[3-5]。有报道显示，hOGG1突变基因型清除oh8Gua和DNA修复的能力降低[6]。

胃癌是我国常见的肿瘤疾病，其发病是遗传因素和环境因素相互作用的结果。本研究通过对河南地区汉族胃癌患者和非肿瘤疾病人群病例-对照研究的方法，检测其外周血中DNA损伤修复酶hOGG1Ser 326Cys单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNP），分析其与胃癌遗传易感性的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010年3月～2011年10月在河南郑州和开封地区经病理学确诊的98例胃癌患者作为病例组，随机抽取与病例组同民族、同居住地、年龄差别小于5岁的非肿瘤人群80例作为对照组。胃癌组男61例，女37例，年龄20～80岁，平均51.9岁。对照组男47例，女33岁，年龄20～79岁，平均50.3岁。两组患者性别构成、年龄组成均差异无统计学意义。收集研究对象血液标本，存于-80℃冰箱待测。通过问卷调查了解研究对象的吸烟史、饮酒史和人口特征。

1.2 基因多态性检测

基因多态性检测应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction restriction fragment length

polymorphism，PCR-RFLP）分析方法，hOGG1Ser326Cys基因的上游引物序列为5，-ACTAGTCTCACCAGCCGTGAC-3，下游引物序列为5，-TGGCC TTTGAGGTA GTCACAG-3，产物为293bp，其PCR反应条件为：95℃预变性5min，95℃ 1min，59.5℃ 1min，72℃ 1min，35个循环后72℃延伸10min。PCR产物经限制性内切酶Fnu4HI于37℃水浴16h，酶切产物经2%琼脂糖凝胶电泳分析。hOGG1ser326cys基因野生型产生293bp一个片段，杂合子产生293bp、169bp和124bp三个片段，突变性产生169bp和124bp两个片段。

1.3 统计学处理

采用SPSS17.0统计软件包进行分析。采用t检验比较病例组与对照组年龄分布差异。x2检验比较病例组与对照性别分布差异、对照组基因型频率Hardy-Weinberg基因平衡定律检测、两组间基因型和等位基因频率的分布差异。采用Logistic回归模型，在校正混杂因素后，计算比值（OR值）及95%可信区间。统计检验均为双侧概率检验，P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 基本情况比较

年龄和性别在病例组和对照组的分布频率差异无统计学意义（均P>0.05）；吸烟在病例组为52.4%（51/98），对照组为36.25（29/80），差异有统计学意义（P<0.05）。饮酒在病例组为54.08%（53/98），对照组为38.75%（31/80），差异有统计学意义（P<0.05）。对照组hOGG1Ser326Cys的基因型分布均符合Hardy-weinberg平衡（x2=4.785，P=0.091），差异无统计意义，该人群具有群体代表性。

2.2 hOGG1Ser326Cys基因多态性与胃癌的发生风险

hOGG1Ser326Cys基因型分析结果见表1。326Cys等位基因频率在胃癌组的分布为48.98%，与对照组41.88%相比，差异无统计学意义（P>0.05）；胃癌组各基因型分别为28.75%，44.90%和26.53%；与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）。以Ser326Ser基因型为参照，Ser326Cys、Cys326Cys和Ser326Cys+Cys326Cys基因型与其相比，Cys 326Cys基因型使患胃癌的危险性分别增加1.7倍（OR=1.706，95%CI=0.341～2.462，P=0.002）。见表1。

2.3 hOGG1Ser326Cys基因多态性与吸烟或饮酒的交互作用

hOGG1Ser326Cys和吸烟或饮酒的交互作用分析见表2。同时携带hOGG1 326Cys等位基因和饮酒的胃癌患者当中，38%是由于两因子的交互作用导致胃癌的发病（S=1.97，API=0.38，P=0.008）。

3 讨论

DNA在内外环境的作用下受到氧化损伤，可启动细胞内不同的损伤修复途径。hOGG1基因是有效的BER修复途径所必需的，但具有SNP的特征，其基因的突变及与环境的相互作用可能导致DNA修复缺陷，增加某些肿瘤的发病风险。本研究结果显示，携带Cys326Cys基因型者患胃癌的危险性增加1.8倍，且携带326Cys等位基因和饮酒的胃癌人群中，38%是由于两因子的交互作用所致。在肺癌的发病过程中有类似报道[7]。考虑该结果可能与326Cys等位基因对氧化损伤的DNA存在修复功能缺陷，且其功能缺陷与ROS导致的DNA线粒体功能紊乱相互作用，诱发肿瘤的发病[8]。饮酒可能增加体内的ROS，导致oh8Gua含量增加，而hOGG1Ser326Cys基因多态性对氧化损伤的DNA修复能力下降，致肿瘤的发病。另外，hOGG1Ser326Cys基因多态性对疾病的影响可能和与地域、种族、环境、SNP位点及其保守性、肿瘤组织及类型的特异性等有关[9]。

[参考文献]

[1] Poplawski T，Arabski M，Kozirowska D，et al.DNA damage and repair in gastric cancer-a correlation with the hOGG1 and RAD51 genes polymorphisms[J].Mutat Res，2006，601（1-2）：83-91.

[2] Tsuzuki T，Nakatsu Y，Nakabeppu Y.Significance of error-avoiding mechanisms for oxidative DNA damage in carcinogenesis[J].Cancer Sci，2007，98（4）：465-470.

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[4] 周秀敏，林菊生.DNA损伤修复与肿瘤的关系[J].国外医学肿瘤学分册，2003，30（4）：261-263.

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[6] Hill JW，Evans MK. Dimerization and opposite base-dependent catalytic impairment of polymorphic S326C OGGI glycosylase[J].Nucleic Acids Res，2006，34（5）：1620-1632.

[7] 钱乾，刘仍允，雷哲，等.hOGG1基因Ser326Cys多态性与肺癌易感性的meta分析研究[J].中国肺癌杂志，2011，14（3）：205-210.

[8] Aditi Chatterjee，Elizabeth Mambo，Yonggang Zhang，et al.Targeting of mutant hogg1 in mammalian mitochondria and nucleus： effect on cellular survival upon oxidative stress[J].BMC Cancer，2006，6（6）：235-247.

[9] 吴双，蒋友胜，袁建辉，等.少数民族人群hOGG1基因多态性与生活方式及DNA氧化损伤的关系[J].卫生研究，2012，41（1）：45-50.

（收稿日期：2013-08-19）