两种梅毒检测方法的研究

【摘要】目的： 比较甲苯胺红不加热血清试验（toluidine red unheated serum test，TRUST）和酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）两种梅毒检测方法的灵敏度，选择适合梅毒临床检测的方法。方法：用TRUST和ELISA对50例临床诊断梅毒患者血清标本和56例非梅毒患者正常血清标本分别进行检测，比较检测结果。结果： TRUST试验阳性敏感性为74.0%，假阳性率为10.7%，ELISA 法试验敏感性为98.0％，假阳性率为1.8%。结论：ELISA 法比TRUST 法的灵敏度和特异性较高，是梅毒临床检测梅毒的首选方法。

【中国分类号】R446.6【文献标识码】A【文章编号】1004-5511（2012）06-0067-01

梅毒是由苍白密螺旋体的苍白亚种即梅毒螺旋体( treponema pallidum，TP) 侵入人体所引起的一种慢性性传播疾病，它可以侵犯皮肤、黏膜及其他多种组织器官，临床表现多种多样，其传播方式有经性接触传播、血液传播和母婴垂直传播3种。近年来其发病率有上升趋势，为了寻找实验室高效、敏感的检测方法，以便尽早对梅毒进行诊断，做到早期治疗，2010年6月-2011年12月我们对TRUST 和ELISA两种检测方法进行比较分析，现将结果报告如下。

1． 材料与方法

1.1 标本来源：选取50例梅毒患者血清作为实验组，均来自我院门诊和住院病人，并经我院性病科确诊，其中潜伏期梅毒9例、Ⅰ期梅毒15例、Ⅱ期梅毒25例、Ⅲ期梅毒 1 例。患者中男37例，女13例，年龄21-55岁，平均33±5.2岁。另选56 例同期门诊或住院非梅毒病人的血清作为对照组，其中健康人 21 例，高血压病10例，冠心病9例，孕妇8例，脑血栓6例，肿瘤2例。其中男39例，女17例，年龄18-57岁，平均24±3.9岁。所有病例均排除心、肝、肾等功能异常者。

1.2 试剂：TRUST 试剂为北京金豪制药股份有限公司产品；ELISA购自厦门新科英创科技有限公司，所有检测操作程序和结果判断均严格按操作规则和试剂说明书进行,并在试剂有效期内使用。所有检测操作采用盲法控制，检测之前将阳性标本和阴性标本随机排序。

1.3 统计学处理：采用 SPSS 11.0 软件进行统计学分析，对计数资料以百分率表示，分析采用 χ2检验，以 P<0.05 为差异有统计学意义。

2． 结果

两种方法检测结果具体见表1。实验组ELISA、TRUST阳性例数分别为49例和37例，阳性率分别为98．0%和74.0%，对照组ELISA、TRUST阳性例数分别为6例和1例，假阳性率分别为10.7%和1.8%，两组阳性率和假阳性率经统计学比较均有显著差别(P<0.05) 。

3． 讨论

梅毒是梅毒螺旋体感染引起的慢性性传播疾病，是可治愈的。但由于病人患病后不愿意到正规医院就诊，导致病情拖延，病程延长，而且症状复杂，病变几乎累及全身各个脏器，给诊断增加难度。由于梅毒具有高传染性，因此必须及早发现病人，及时给与正规治疗，才能及时控制传染源，预防疾病扩散。梅毒螺旋体一旦侵入人体，一段时间后血清中可产生特异性的抗体和非特异性的“反应素”［1］：一种是梅毒螺旋体特异性抗体，包括 IgM、IgG，一般在感染梅毒螺旋体后 2 周左右即可产生，由于是特异性抗体检测这种抗体的实验称为确诊实验，临床上常用于筛查标本的阳性的确认，常见的实验有TPPA、TP-ELISA、梅毒螺旋体血凝试验；另一种是非梅毒螺旋体特异性抗体，是梅毒螺旋体在破坏时释放的抗原性物质刺激抗体产生的反应素，出现较特异性抗体约晚 2-3 周，检测这种抗体的实验称为初筛实验。如：梅毒血清学实验、TRUST、不加热血清反应素玻片试验等［2］。TRUST 实验所用的试剂是非特异性类脂质抗原（心磷脂）检测抗心磷脂抗体，检测非特异性反应素，由于此类抗原的大部分可以与其他非特异性抗体有交叉反应，易受某些传染病及自身免疫性疾病等因素的影响，从而出现生物学假阳性。本次实验中，出现了6例假阳性，TRUST假阳性率达10.7%，出现了13例假阴性，假阴性率也达到26.0%，这也说明TRUST法的灵敏度和特异性均较差。ELISA是近年来在梅毒螺旋体基因工程的研制成功的基础上建立起来的一种血清学检测方法，是将梅毒螺旋体基因重组抗原 TP47、TmPA 包被在微孔反应板上，和辣根过氧化物酶标记 TP47、Tm-PA，通过双抗原夹心法检测血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体。利用抗原的不同特性，具有双重识别机制，使假阳性和假阴性不易出现，联合使用可得到更高的敏感性和特异性［3］。本次实验中，出现了1例假阳性、 1例假阴性，假阳性率、假阴性率分别为2.0%和1.8%，这也说明ELISA检测法的灵敏度和特异性均较高。在实际的工作中，TRUST方法虽然敏感性及特异性较差，易受人为因素影响，但是由于操作简便易行，检查迅速，能很快就出结果，很适合大批量的样本筛查，尤其是各级口岸出入境检验检疫部门的筛查，而ELISA由于具有更高的灵敏度和特异性、不受溶血和纤维蛋白影响，可与全动免疫分析系统结合，便于自动化检测，适合各级医院及有条件的实验室进行标准化管理。可以说TRUST、ELISA梅毒检测方法各有特点，各有其适用的范围，具有很强的互补性，目前看来，ELISA梅毒检测方法尚不能完全取代TRUST法。

参考文献

［1］陈 鹏，曹 婕，王 琳.几种梅毒血清学检测方法的比较与分析［J］.吉林医学2011,32(25):5224.

［2］林 玲 姜习新．两种梅毒血清学方法的检测和评价［J］．实用医技杂志，2011，18(8):842－843．

［3］石娜． 利用 ELISA 检测梅毒结果分析［J］． 泰山医学院学报，2010，31( 2) :144．